形态染色
形态染色-HE染色
苏木精 — 伊红染色法 ( hematoxylin-eosin staining ) ,简称HE染色法 ,石蜡切片 技术里常用的染色法之一 。 苏木精染液为碱性 , 主要使细胞核内的染色质与胞质内的核 酸着紫蓝色 ;伊红为酸性染料 , 主要使细胞质和细胞 外基质中的成分着红色 。
实验目的
观察组织的病理学变化 ,如炎症 , 坏死 ,癌变
实验结果
细胞核被苏木精染成鲜明的蓝色 , 软骨基质、 钙盐颗粒呈深 蓝色 ,粘液呈灰蓝色。 细胞浆被伊红染成深浅不同的粉红色至桃红色 ,胞浆内嗜酸 性颗粒呈反光强的鲜红色。 胶原纤维呈淡粉红色 , 弹力纤维呈亮粉红色 , 红血球呈橘红 色 , 蛋白性液体呈粉红色。 着色情况与组织或细胞的种类有关 ,也随其生活周期及病理变化而改变。 例如 ,细胞在新生时期胞浆对伊红着色较淡或轻度嗜碱 , 当其衰老时或发生退行性变则呈现嗜伊红浓染。 胶原纤维 在老化和出现透明变性时 ,伊红着色由浅变深。
形态染色-masson染色
masson染色是指用两种或三种阴离子染料混合 ,胶原纤维呈蓝色 ,肌纤维呈红色 ,细胞核呈蓝色。 用来显示组织中纤维以及炎性因子的染色方法之一。
实验目的
看组织是否发生纤维化
实验结果
胶原纤维、 粘液、 软骨呈蓝色(如光绿液染色为绿色) ,胞浆、 肌肉、 纤维素、 神经胶质呈红色 ,胞核 黑蓝色。
形态染色-天狼猩红染色
天狼猩红是强酸性染料, 易与胶原分子中的碱性基团结合, 吸附牢固。偏振光镜检查, 胶原纤维有正的单轴 双折射光的属性, 与天狼猩红结合, 可增强双折射, 提高分辨率, 从而区分两型通过其磺酸基团, 与胶原蛋白分子 上的碱性基团反应, 产生红色
实验目的
区分I型胶原和III胶原, 纤维化病变III胶原会增多
染色结果
普通光镜观察∶
胶原纤维呈红色, 细胞核呈绿色, 其他成分呈黄色。
偏振光显微镜下观察∶
I型胶原纤维∶ 红色或黄色, 排列紧密, 具强双折光性
Ⅱ型胶原纤维∶ 多种色彩, 疏松网状、弱双折光性
Ⅲ型胶原纤维∶ 绿色、细纤维、弱双折光性
IV型胶原纤维∶ 淡黄色、弱双折光性(基膜成分)
形态染色-番红固绿染色
番红 -固绿软骨染色法的染色原理在于嗜碱性的软骨与碱性染料番红 O 结合呈现红色 , 嗜酸性的骨和酸性染料固绿 结合而成蓝色 , 与呈现红色的软骨对比鲜明。
实验目的
将软骨组织和骨组织区分开
染色结果
软骨:呈红色
骨头:绿色或者蓝色
形态染色-AB-PAS染色
AB— PAS染色是较为常用的一种粘液染色方法 ,此方法的特点是通过使用两种不同粘液物质染色的染料 分别显示不同的粘液物质于同一组织切片。
实验目的
在病理状态下 , 胃、肠、结缔组织、 心肌、 肾脏等器官 ,也可以出现粘液变性、 粘液水肿、 黏蛋白增多的现象, 也需要粘液物质染色区分和证明。
在一些肿瘤的诊断和研究中也常常需要粘液染色进行观察和鉴别
染色结果
酸性粘液物质呈蓝色
中性粘液物质呈红色
混合粘液物质呈蓝紫色
细胞核呈浅蓝色
形态染色-甲苯胺蓝染色
甲苯胺蓝是常用的人工合成染料的一种, 属于醌亚胺染料类, 这类染料一般含有两个发色团, 一个 是胺基, 一个是醌型苯环, 来构成色原显色。
实验目的
它能够清楚地显示软骨形态潮线等结构-染软骨,
能将组织内的肥大细胞清晰地显示出来-染肥大细胞
肥大细胞: 肥大细胞(mast cell) 广泛分布于皮肤及内脏粘膜下的微血管周围。分泌多种细胞因子, 参与免疫调节(TB细胞 ,APC细胞活化)。表达MHC分子 ,B7分子,具有APC功能。 表达大量的IgE Fc 受体 ,释放过敏介质。具有弱吞噬功能。 和血液的嗜碱粒细胞同样 ,具有强嗜碱性颗粒的组织细胞。
染肥大细胞的实际目的 :看组织附近是否有免疫反应发生
染色结果
染细胞核使之呈蓝色;
肥大细胞胞质内含有肝素和组织胺等异色性物质遇到甲苯胺蓝可呈异染性紫红色
免疫组化实验
实验原理:抗原抗体反应,即抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使酶标记的抗体. 与显色剂进行显色反应,生成有色的不溶性产物,来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质),对其进行定位、定性及相对定量。
实验目的
通过染色结果强弱,对所研究蛋白在组织水平的表达进行判断比较
免疫荧光实验
免疫荧光(IF)是一种用于检测以及识别细胞和组织中蛋白质和其他分子的亚细胞分布和迁移的强大检测技术
与免疫组化的区别:用到的二抗种类不一样;免疫组化-HRP二抗-DAB化学显色 ;免疫荧光-荧光二抗-荧光显色
多色免疫荧光实验
相较于单靶标染色,多重成像对于肿瘤微环境的分析更加深入,因此能够给研究人员、临床医生和药物开发人员带来更多益处。从临床角度来看,相较于使用单个预测性生物标志物,同时检测多个生物标志物对于患者分级和对于治疗的反应预测更加可靠。对于基础研究,多重成像可以提高发现新的生物标志物和可治疗性靶向通路的速率。
组织芯片
组织芯片(tissue chip)又称组织微阵列(tissue microarray,TMA),是以形态学为基础的分子生物学新技术,将数十至上千个小组织标本以规则阵列方式整齐排布于同一载体上而制成的组织切片,它是继基因芯片、蛋白质芯片之后出现的又一种重要的生物芯片,主要用于研究同一种基因或蛋白质分子在不同细胞或组织中表达的情况,具有高通量、大样本、省时快速等优点。
MicroCT
CT(Computed Tomography),即计算机断层扫描,是计算机控制、X线成像、电子机械技术和数学相结合的产物。显微CT(micro computed tomography),又称微型CT,是一种非破坏性的3D成像技术,可以在不破坏样本的情况下清楚了解样本的内部显微结构。它与普通临床的CT最大的差别在于分辨率极高,可以达到微米(μm)级别,显微CT可用于医学、药学、生物、考古、材料、电子、地质学等领域的研究。
实验目的
观察成骨愈合情况或者血管生长情况相关情况
硬组织切片及染色
硬组织切片针对未脱钙的骨组织,牙齿,植入非金属生物材料的骨组织,木质化程度高的未经软化的植物组织,利用塑料包埋成硬组织块,用莱卡硬组织切片机配合钨钢刀片进行切片。
切片厚度10um左右,然后对硬组织切片进行脱塑及后续特殊染色
实验目的
1.用于观察新骨形成、骨组织酶的组织化学检测、骨组织自带荧光如钙黄绿素荧光,植物的木质部结构。
2.有效解决骨组织脱钙时间过长的问题及木质化程度高的植物组织软化时间过长及软化化学试剂对木质部结构破坏的问题